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分享魚(yú)皮質(zhì)醇(COR)ELISA檢測(cè)試劑盒靈敏度值

更新時(shí)間:2018-02-27      瀏覽次數(shù):1761

魚(yú)皮質(zhì)醇(COR)ELISA檢測(cè)試劑盒靈敏度值實(shí)驗(yàn)室

魚(yú)皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒

英文名稱:Fish Cortisol ELISA Kit
實(shí)驗(yàn)類型:夾心法
檢測(cè)范圍:50 pg/mL – 1600 pg/mL
zui低檢測(cè)限:10 pg/mL
應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途)

實(shí)驗(yàn)原理:
將目標(biāo)包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的結(jié)合,然后加入微生物化的目標(biāo),將未結(jié)合的生物素洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。

魚(yú)皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成96孔配置48孔配置備注
微孔酶標(biāo)板8孔×12條8孔×6條 無(wú)
標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL×6管0.3mL×6管無(wú)
樣本稀釋液6mL3mL無(wú)
檢測(cè)抗體-HRP10mL5mL無(wú)
20×洗滌緩沖液25mL15mL按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋
底物A6mL3mL無(wú)
底物B6mL3mL無(wú)
終止液6mL3mL無(wú)
封板膜2張2張無(wú)
說(shuō)明書(shū)1份1份無(wú)
自封袋1個(gè)1個(gè)無(wú)
 

 

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

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